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拿到新的C18液相色谱柱如何处理

更新时间:2019-01-02      点击次数:2915

常用的c18液相色谱柱,当拿到新的C18柱时应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?

新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡。特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。

具体平衡方式也很简单,多进几次测试样品,直到峰面积和保留时间稳定,再进行正式进样测定。

如果要加快平衡时间,把前面用来平衡的进样样品浓度加大,或者不等洗脱完成,连续进样多针。用待测物对新柱平衡,目的是将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。

 

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