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液相色谱等度梯度有什么不同

发表时间:2019-12-21      点击次数:3302

新手学液相色谱,会碰到两种洗脱方式:等度洗脱和梯度洗脱,什么情况下会用到等度,哪些条件下用梯度,有什么不同?

1、洗脱的改变与不改变的配比不同

等度洗脱:流动相的组成比例和流速恒定不变。

梯度洗脱:改变流动相的浓度配比。

2、它们的定义不同

等度洗脱定义:液相色谱操作中,等度洗脱即在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。

梯度洗脱定义:梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。

用梯度洗脱还是等度洗脱,主要看杂质的情况。同一物质有梯度洗脱和等度洗脱两种条件时,梯度洗脱的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好(不好的话就要用梯度洗脱)。

1、杂质和主成分极性相差很大,杂质一定要全部都能洗脱出来(有时等度情况下冲两三个小时杂质也冲出不来,就必须考虑用梯度)。

2、杂质和主成分极性相差较大杂质出峰太晚(等度冲两个小时出来个杂质,就可以通过梯度缩短检样时间

3、还有就是杂质极性比主峰的大,等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边,杂质分开主峰又出峰太晚,这种情况也得考虑梯度洗脱。

在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度,用梯度要麻烦一些

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