液相色谱柱堵塞是液相色谱系统常见的故障之一，其直接表现为柱压异常升高、流路不畅，甚至导致实验数据失真或仪器损坏。以下是系统性的解决方案及预防策略：
一、堵塞的表现与核心成因
- 典型现象
- 柱压急剧升高(超过正常范围)，若不及时处理可能导致泵密封圈磨损、管路变形等连锁问题。
- 根本原因分析
- 细菌污染：流动相(尤其是含缓冲盐的水溶液)长期存放易滋生细菌，形成生物膜堵塞筛板。
- 杂质沉积：样品中的颗粒物、未净化全的残留物或流动相中的固态微粒在柱头累积。
- 操作失误：如接口不匹配导致管路变形、手动六通阀转动不到位形成死堵、废液管结晶堵塞等。
二、系统性查堵流程与针对性处理
- 分段排查法
- 溶剂过滤头检查：断开真空泵入口，观察PEEK管液体滴落速度。若停滞或缓慢，需用30%硝酸浸泡30分钟后超纯水冲洗。
- 过滤白头检测：打开冲洗阀(purge阀)，若压力未显著下降，取出过滤白头并用10%异丙醇超声清洗30分钟。
- 色谱柱验证：拆下色谱柱出口端，若压力仍高，表明柱内堵塞。可尝试反向冲洗(进出口调换)或更换入口筛板(注意可能降低柱效)。
- 柱内堵塞专项处理
- 缓冲盐堵塞：改用95%水+5%有机相低流速冲洗，逐步置换高盐流动相。
- 强保留物质堵塞：采用更强洗脱能力的流动相(如增加乙腈比例或添加改性剂)冲洗。
- 顽固性堵塞：联合超声波清洗或专用柱清洗装置，深度清除填料间隙污染物。
三、日常维护与预防策略
- 流动相管理
- 避免使用纯水作为流动相储液瓶，推荐10%甲醇水溶液抑制细菌生长
- 配制流动相需经0.22μm滤膜过滤，并现配现用(尤其含缓冲盐时)。
- 操作规范优化
- 定期更换泵密封圈、在线过滤器等易损件，防止机械故障引发堵塞。
- 废液瓶应预先加入少量水封，避免高浓度缓冲盐溶液在金属管口结晶。
- 色谱柱保护措施
- 每次使用后用10%甲醇水冲洗30分钟，再用纯甲醇保存，避免 buffer 残留。
- 建立色谱柱使用日志，记录进样次数、压力变化及异常现象，及时预警寿命终结。
液相色谱柱堵塞的本质是流路系统的动态平衡被破坏。通过“精准诊断—分级处理—科学养护”的闭环管理，可有效降低故障率。
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